Comparación de la síntesis de interleucina- 1β por monocitos y linfocitos B estimulados con lipopolisacárido en pacientes conenfermedad periodontal / Interleukin-1β production by peripheral blood monocytes and B lymphocytes in patients with periodontal disease

Antecedentes: la interleucina-1β- (IL-1β) se considera un mediador en la pérdidaósea en enfermedad periodontal. No es claro si existen diferencias en la producciónde IL-1b ex vivo por linfocitos B (LB) y monocitos (Mo) de sangre periféricaentre pacientes sanos y con enfermedad periodontal. Objetivo: cuantificar laproducción de IL-1β por LB y Mo de sangre periférica de individuos con enfermedadperiodontal y sin esta en presencia de lipopolisacárido (LPS). Métodos: setomaron células de cinco individuos con diagnóstico sano/gingivitis, cinco conperiodontitis crónica (PC) y cinco con periodontitis agresiva (PAg). Los Mo y LB desangre periférica se purificaron con anticuerpos anti-CD14 y anti-CD19 marcadoscon perlas magnéticas. La pureza de las poblaciones celulares fue confirmadapor citometría de flujo. Las células se estimularon con LPS y la producción deIL-1b se cuantificó por ELISA. Resultados: las concentraciones basales de IL-1bproducidas por LB fueron menores en sujetos con PC comparados con sujetoscon PAg (p = 0,03) e individuos sanos (p = 0,0079). En presencia del estímulo, seincrementaron sin encontrarse diferencias entre los grupos. La IL-1b producidapor los Mo a nivel basal y frente al estímulo fue similar entre los sujetos, peromayor comparada con la liberada por los LB (p = 0,0079 en PC y p = 0,00571 en PAg)en pacientes con periodontitis. Conclusiones: la producción de IL-1b por LB enel estado basal está significativamente disminuida en pacientes con PC, comparadocon sanos y PAg, pero una vez estimulados con LPS, la respuesta es similaren los tres grupos. La capacidad de los LB para producir IL-1b en respuesta alestímulo con LPS es limitada comparada con la de los Mo...

loss in patients with periodontal disease. It is unclear whether there are differencesin the production of IL-1 b ex vivo by B cells and monocytes from peripheralblood between healthy patients and with periodontal disease. Objective:To quantify the production of IL-1b by monocytes and peripheral blood B cellsof individuals with and without periodontal disease in the presence of lipopolysaccharide(LPS). Methods: Monocytes and peripheral blood B cells from 5healthy/gingivitis, 5 chronic periodontitis (CP) and 5 aggressive periodontitis(AgP) patients were purified with anti-CD14 and anti-CD19 marked with magneticbeads. The purity of the cell populations was confirmed by flow citometry. Cellswere stimulated with LPS and the production of IL-1b was quantified by ELISA.Results: Basal levels of IL-1b produced by B lymphocytes were lower in subjectswith chronic periodontitis than in healthy (p = 0.0079) and aggressive periodontitispatients (p = 0.03). In presence of LPS, the IL-1b levels are increased withno differences between groups. IL-1b produced by monocytes at baseline andwith LPS, was similar between subjects, but higher compared to that releasedby B lymphocytes (p = 0.0079 in chronic periodontitis, p = 0.00571 in aggressiveperiodontitis) in the periodontitis groups. Conclusions: The production of IL-1bby LB at baseline is significantly reduced in CP patients compared to healthy andAgP, but once stimulated with LPS, the response is similar in the three groups.The ability of LB to produce IL-1b in response to stimulation with LPS is lowercompared with monocytes...

Comparación de técnicas de disgregación mecánica, enzimática y mecano-enzimática en la extracción de poblaciones linfocitarias y macrófagos en tejidos con periodontitis crónica avanzada / Comparison of mechanical, enzymatic and mechanical-enzymatic dissagregation tecniques in extraction of lymphocytary populations and macrophagues in tissues with chronic advanced periodontitis

ANTECEDENTES: En este estudio se compararon tres técnicas de disgregación en la recuperación de poblaciones linfocitarias y macrófagos en tejidos con periodontitis crónica avanzada. OBJETIVO: comparar, por citometría de flujo,el recuento de poblaciones linfocitarias y macrófagos de biopsias de tejidos periodontalmente afectados, con tres procesos previos de disgregación celular (mecánica, enzimática con colagenasa y mecano-enzimática) para observar cuál de éstos es más efectivo en la recuperación celular y produce menos alteraciones en los marcadores de superficie. MÉTODOS: Se realizó un estudio descriptivo comparativo donde se eligió una muestra de 11 biopsias de tejidos con periodontitis crónica avanzada.El procedimiento consistió en tomar las biopsias por medio de biseles internos que se colocaban en un Eppendorf con el medio de transporte. En el grupo 1 se realizó la técnica de disgregación mecánica Medimachine®, en el grupo 2 técnica enzimática (colagenasa 2%), y el en grupo 3 técnica mecano-enzimática (Medimachine® y colagenasa 2%). Posteriormente las muestras fueron analizadas por un citómetro de flujo FACSAria (Becton Dickinson San José California). RESULTADOS: No se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre las tres técnicas de disgregación en la recuperación de poblaciones linfocitarias; sin embargo, hubo una mayor recuperación de macrófagos con la técnica mecano-enzimática comparada con la mecánica, siendo estas diferencias estadísticamente significativas.CONCLUSIONES: Las tres técnicas estudiadas presentaron resultados comparables en cuanto a recuperación y daño a los marcadores de superficie,por lo cual, por tiempo y costo, se aconseja realizar una técnica mecánica con Medimachine®.

BACKGROUND: Three disaggregation techniques for the recovery of lymphocyte and macrophage populations from tissues with advanced chronic periodontitis were analyzed. OBJECTIVE: Compare by flow cytometry the recovery of lymphocyte and macrophage populations from biopsies of periodontal tissues with periodontitis by using three processes of cellular disaggregration (mechanical, enzymatic with colagenase and mechanical-enzymatic) to observe which of these is more effective and produces fewer alterations in the surface markers. METHODS: A comparative descriptive study was carried out with a sample of 11 biopsies of tissues taken from sites with advanced chronic periodontitis. The procedure consisted of taking the biopsies by means of internal bevels and placing them in an Eppendorf for transportation. In group 1, the mechanical technique of disaggregation (Medimachine®) was carried out. In group 2, the enzymatic technique (colagenase 2%) was used. In group 3, the mechanical-enzymatic technique (Medimachine® and colagenase 2%) was perfomred. Later on, the samples were analyzed with a FACS-Aria cytometer (Becton Dickinson San José California). RESULTS: There were not statistically significant differences among the three disaggregation techniques for the recovery of lymphocyte populations. However, there was a bigger recovery of macrophages with the mechanical-enzymatic technique when compared to the other two techniques, being statistically significant. CONCLU SIONS: The three techniques studied produce similar results in the recovery and damage to the surface markers; hence, considering time and cost constrains, it is advisable to carry out the mechanical technique with Medimachine®.

Expresión MMP-13 en enfermedad periodontal / MMP-13 expression in periodontal disease

Objetivo: determinar si existe diferencia en la expresión y localización de MMP-13 en periodonto sano, agrandamiento gingival inducido por placa bacteriana, periodontitis crónica moderada/avanzada y periodontitis agresiva, mediatne inmunohistoquímica para evidenciar un posible papel de esta colagenaa en la progresión del daño tisular en patologías infecciosas del periodonto. Métodos: el tipo de diseño seguido en este estudio fue observacional comparativo. Se tomaron biopsias de 22 pacientes que fueron diagnosticados como 5 sanos (S), 6 periodontitis crónica (PC), 6 periodontitis agresia (PA) y 5 agrandamiento gingival inducido por placa bacteriana (AGIPB), analizándose 4 estratos tisulares en cada biopsia: epitelio oral (EO), epitelio de unión (EU), conectivo adyacente al epitelio de unión (CAEU) y conectivo profundo (CP). El tipo de muestreo fue intencional, ya que los investigadores conocían las características de los sujetos que se escogieron para el estudio. Las muestras se colocaron en formalina al 10 por ciento y se incluyeron en bloques de parafina, para posteriormente realizar la técnica de inmunohistoquímica. Se hizo valoración semicuantitativa determinada por conteo celular al microscopio de luz (40X). Resultados: la mayor expresión de MMP-13 se da en la periodontitis crónica (PC) seguida por el agrandamiento gingival inducido por placada bacteriana (AGIPB), periodontitis agresiva (PA) y finalmente los pacientes sanos que no mostraron expresión alguna de esta colagenasa. El estrato tisular que más expresión mostró fue el epitelio oral a nivel del estrato granuloso. Conclusión: la MMP-13 no se expresa en biopsias de tejido sano. La expresión se presenta en tejidos que se encuentran en procesos de destrucción o de remodelación

Evaluación de los mecanismos oxidativos del PMN neutrófilo de saliva de pacientes periodontalmente sanos por reducción de NBT / An evaluation of the oxidative mechanisms of salivary PMN neutrophil in saliva of periodontally healthy patients by NBT reduction

Antecedentes: en general, las enfermedades periodontales se caracterizan por cambios, tanto estructurales como bioquímicos en el ámbito tisular, y en su patogenia, por contraste de infecciones bacterianas, el neutrófilo es considerado como la célula más importante de la inmunidad innata. La importancia de esta célula radica en el hecho de estar presente en cada uno de los cuatro estadios que caracterizan el avance de la lesión, así como en los hallazgos de susceptibilidad a infecciones bacterianas recurrentes, incluyendo enfermedad periodontal, en pacientes con defectos cualitativos y cuantitativos en PMN neutrófilos de sangre periférica. Una de las alteraciones funcionales del neutrófilo asociada a la pérdida de la capacidad de defensa ejercida por esta célula contra bacterias extracelulares, la constituye el hecho de ser incapaz de acivar sus mecanismos oxidativos para producir la muerte intracelular de los microorganismos ingeridos. Objetivo: evaluar la capacidad del PMN neutrófilo de saliva y sangre periférica de pacientes periodontalmente sanos para activarse y utilizar losmecanismos microbicidas dependientes de oxígeno, para reconocer si el PMN neutrófilo, al migrar a través del surco gingival, conserva intacta su funcionalidad. Métodos: el estudio fue descriptivo comparativo, in vitro. Para su desarrollo se formaron muestras de saliva y de sangre periférica de 5 individuos. Los neutrófilos aislados fueron sometidos a activación con phorbol miristato acetato (PMA) y posteriormente a las pruebas de reducción del nitroazul de tetrazolio, el cual se puede cuantificar por observación directa al microscopio de luz. Resultados: los PMN neutrófilos obtenidos de sangre y saliva reducen el NBT en un porcentaje más ato que los PMN neutrófilos de sangre periférica, en ausencia de activación. Se encontró que los PMN neutrófilos de saliva tienen un estado de activación de base debido a su constante exposición a las bacterias de la cavidad bucal, y una vez que se activan, dichas células reducen el NBT en menor cantidad que los PMN neutrófilos de sangre periférica bajo iguales condiciones. Conclusiones: los PMN neutrófilos de saliva son células funcionales capaces de activarse, ya que mantienen intactos los mecanismos oxidativos una vez llegan a la saliva a través del surco gingival

Función fagocítica del neutrofilo salival en individuos sanos y con periodontitis crónica / Phagocytic function of salivary neutrophil in healthy versus chronic periodontitis patients

ANTECEDENTES: La actividad del PMN neutrófilo en saliva es controversial. Algunos autores proponen que cuando dicha célula llega a la cavidad oral proveniente del surco gingival, varias de sus funciones están alteradas; incluso ha llegado a hipotetizarse que es una célula post-inflamatoria no funcional. La fagocitosis es el objetivo final del neutrófilo, y defectos a este nivel se relacionan constantemente con una gran variedad de enfermedades. Dado que estas células juega un papel principal en la defensa del huésped contra infecciones periodontales, este estudio examinó el PMN neutrófilo de saliva para establecer si mantiene un parámetro normal en cuanto a capacidad fagocita se refiere o, por el contrario, si su función está alterada al compararlo con el PMN neutrófilo en sangre periférica. Paralelamente, se estudio como la presencia de periodontitis puede afectar la fagocitosis. OBJETIVO: comparar la capacidad fagocítica del neutrófilo salivar y de la sangre periférica en pacientes sanos y con periodontitis crónica. METODOS: se tomaron cinco pacientes periodontalmente sanos con índices gingivales de loe y silness 0-1 y cinco pacientes con diagnóstico previo de periodontitis crónica que presentaran al menos 30/100 de los dientes con bolsas mayores de 5 mm. A cada paciente se le tomaron muestras de sangre y saliva, de donde se procedió a aislar el PMN neutrófilo; se recolector por enjuague oral con solución salina. Después de unir las células a cubreobjetos de vidrio, se midió la actividad fagocítica por ingestión de Cándida albicans opsonizada. RESULTADOS: el índice de fagocitosis (IF) del neutrófilo salival fue mayor que el IF hallado para el neutrófilo de sangre en ambos grupos de pacientes, pero las diferencias no fueron estadísticamente significativas. CONCLUSIONES: el neutrófilo aislado de saliva es una célula viable, adherente, con una actividad fagocítica comparable a la actividad del neutrófilo de sangre periférica. Además, de acuerdo con los resultados del presente estudio, la presencia de periodontitis crónica no aparece afectar la actividad fagocítica.

Evaluación de la profilaxis como procedimiento terapeútico dentro del tratamiento periodontal integral / Evaluation of profilaxis as a therapeutic procedure in the integral periodontal treatment

El objetivo principal del siguiente artículo es determinar la eficacia o ineficiencia de la profilaxis en cuanto a la respuesta de los tejidos se refiere, al utilizarlo como procedimiento terapeútico dentro del tratamiento dental después de raspaje ya lisado radicular o de un procedimiento quierúrgico.